家庭流感快速自我检测的诊断准确性:前瞻性比较准确性研究gydF4y2Ba

介绍gydF4y2Ba

背景gydF4y2Ba

在美国最近的流感季节(2019年10月至2020年4月)，估计有3900万至6200万人感染，导致1800万至2600万人次就诊，2.4万至6.2万人死亡[gydF4y2Ba1gydF4y2Ba]。经济影响是成比例的——2018年季节性流感给美国造成的损失估计为112亿美元，其中包括32亿美元的直接医疗费用和估计损失的2010万生产小时[gydF4y2Ba2gydF4y2Ba]。通过早期干预措施对流感患者进行诊断，并通过抗病毒治疗或行为改变进行干预以减少传播，可改善对健康和经济的负面影响。gydF4y2Ba

仅根据临床特征诊断流感是不准确的;因此，一些临床指南支持对呼吸道标本(通常是鼻腔或鼻咽)进行实验室检测以检测流感病毒。流感的实验室检测越来越多地转向使用护理点(POC)设备进行临床检测[gydF4y2Ba3.gydF4y2Ba]。快速诊断测试(rdt)是一类POC测试，只需几个简单步骤即可完成，通常不需要仪器或特殊用品，这增加了未经培训的个人在临床环境之外使用这些测试的可能性[gydF4y2Ba4gydF4y2Ba]。家庭使用的流感RDTs可能会扩大获得检测的机会并降低成本，从而促进早期诊断并缩短从症状出现到适当护理的时间，例如接受抗病毒治疗或改变行为以尽量减少传播[gydF4y2Ba5gydF4y2Ba]。家庭检测流感和其他呼吸道病毒的优势在大流行的情况下可能更为重要，因为隔离病例和限制与潜在病例的接触是控制疫情的重要组成部分[gydF4y2Ba6gydF4y2Ba，gydF4y2Ba7gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

几项研究已经调查了流感自我拭子和自我检测的准确性。最近对13项研究的系统回顾发现，流感是通过自行收集的鼻腔或中鼻甲样本检测出来的，其准确性与卫生保健专业人员收集的样本相似[gydF4y2Ba8gydF4y2Ba]。在常规卫生保健环境中测试的随机对照试验显示，敏感性和特异性分别为60%至70%和90%至100% [gydF4y2Ba9gydF4y2Ba，gydF4y2Ba10gydF4y2Ba];然而，由于家庭测试的新颖性，很少有在家庭环境中进行rdt研究。目前，美国食品和药物管理局还没有批准在家中检测流感的检测方法。gydF4y2Ba

家庭检测流感或其他呼吸道病毒的一个主要障碍是，RDTs通常不如基于实验室的检测准确，即使是由卫生保健工作者使用[gydF4y2Ba11gydF4y2Ba，gydF4y2Ba12gydF4y2Ba]。许多变量影响检测的效果，包括样本质量、感染流行率、发病后及时检测以及在较轻病例中较低的病毒载量。这些变量尚未在POC环境中得到充分研究[gydF4y2Ba9gydF4y2Ba，gydF4y2Ba13gydF4y2Ba-gydF4y2Ba15gydF4y2Ba]或家庭居民;据我们所知，只有一项公开的研究试图评估在家中使用RDT进行整个自检的准确性和可行性[gydF4y2Ba16gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

客观的gydF4y2Ba

在这项研究中，我们评估了由流感样疾病的非专业用户在家中进行的流感RDT的准确性，并将同一个人邮寄到实验室进行参考测试的自我收集样本进行了比较。gydF4y2Ba

方法gydF4y2Ba

研究设计gydF4y2Ba

我们对患有急性呼吸道疾病(ARI)的个体进行了一项前瞻性、比较准确性的家庭流感RDT研究。这项研究是西雅图流感研究(SFS)的一个子研究，该研究在全市范围内对流感和其他呼吸道病毒感染进行了社区监测。食物安全支援计划涉及同日自拭子样本[gydF4y2Ba17gydF4y2Ba];符合条件并参加自检子研究的参与者接受了额外的居家流感RDT。将RDT结果与邮寄返回的自行收集的中鼻甲鼻拭子样本的结果进行比较，并通过实验室定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测，如下所述[gydF4y2Ba17gydF4y2Ba]。参与者还回答了一份调查问卷，其中包括他们的症状、风险因素和人口统计信息。gydF4y2Ba

伦理批准gydF4y2Ba

该研究已获得华盛顿大学人类受试者部(STUDY00006181)的批准，并在研究入组前获得知情同意。本研究的报告遵循诊断准确性研究报告标准(standard for Reporting of Diagnostic Accuracy Studies)指南[gydF4y2Ba18gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

招聘gydF4y2Ba

参与者是通过Facebook、Instagram、Twitter和谷歌等网站上的定向网络广告招募的。此外，还通过安全服务处设立的社区服务站、卫生保健提供者、旅行诊所、移民和难民健康检查、当地学校和工作场所的亲自介绍进行了招聘。潜在的参与者被引导到一个研究网站，在那里他们根据年龄、邮政编码、症状、症状出现的时间和他们的智能手机操作系统进行筛选。参与者在完成研究程序后获得20美元的电子礼品卡补偿;如果他们归还了参考棉签，但没有完成调查，他们仍然得到15美元的补偿。gydF4y2Ba

样本大小gydF4y2Ba

招募目标是招募3000名参与者，假设2400名(80%)参与者将完成所有步骤，流感患病率为12.5%，这将为我们提供300个流感阳性样本。研究完成后，向所有参与者发送了高达20美元的电子礼品卡。gydF4y2Ba

参与者gydF4y2Ba

参与者于2020年2月19日至3月9日从美国华盛顿州的大西雅图地区招募，该地区有74.4万人口。资格标准包括那些自我确认在过去72小时内有咳嗽或至少两种新的或恶化的ARI症状(即感觉发烧、头痛、寒战或颤抖、喉咙痛、恶心或呕吐、流鼻涕或鼻塞、不适、肌肉或身体疼痛、呼吸困难、腹泻、皮疹、耳痛或分泌物)的人[gydF4y2Ba19gydF4y2Ba，gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba]。此外，参与者被要求年龄≥5岁，居住或工作在符合条件的邮政编码范围内，能够理解英语研究说明，能够在蓝牙设备上使用研究应用程序进行研究程序和Ellume家庭流感测试(EHFT)。gydF4y2Ba

测试前数据收集gydF4y2Ba

参与者以电子方式表示同意;家长或法定监护人同意未满18岁的参与者，并为13至18岁的参与者提供同意书，使用REDCap (Research Electronic Data Capture;范德比尔特大学)[gydF4y2Ba21gydF4y2Ba]，由华盛顿大学转化健康科学研究所主办。经同意后，REDCap仪器获得参与者的家庭住址和联系信息，以便通过快递提供流感试剂盒。gydF4y2Ba

流感试剂盒组件和交付gydF4y2Ba

研究小组为符合美国有关运送生物物质(乙类)的规例而制作的流感药盒[gydF4y2Ba22gydF4y2Ba]。流感试剂盒包含1个教学快速入门指南;标记为研究设备(EHFT)的流感RDT，包括中鼻甲拭子、缓冲液、滴管和蓝牙样本分析仪;参考样本试剂盒包含1根中鼻甲拭子(Copan, FLOQSwabs 56380CS01)， 1管3 mL病毒转运培养基(VTM;目录# 220220;Becton, Dickinson and Company Ltd .)， 1个带吸收袖的标本运输袋(cat。# 11215 - 684;VWR International LLC, 1个回收箱(S-16524;ULINE)和1个回传邮件(S-3355;ULINE)第二层包装。 If participants reported errors with the EHFT, a second kit was sent out as soon as possible during staffing hours (within 12 hours).

流感试剂盒在登记后24小时内送到参与者家中，大多数在2小时内送到。营业时间后收到的登记将在第二天早上处理并寄出。每个试剂盒都包含一个唯一的条形码编号(位于每个试剂盒中的以下三个地方:在3ml试管上，返回邮件和快速启动指南上)，以链接调查，EHFT结果和参考测试结果进行分析。参与者被要求确认他们试剂盒管上的条形码与快速入门指南上的条形码相匹配，并在REDCap调查中输入这个条形码。在将多个试剂盒发送到同一家庭的情况下，在REDCap中输入的条形码允许将实验室收到的参考样本与正确的参与者联系起来，即使在参与者之间交换试剂盒。一旦参与者完成了他们的家庭研究程序，他们被要求使用提供的材料，在完成测试后的24小时内通过美国邮政服务将他们的参考样本邮寄到华盛顿大学的研究实验室。gydF4y2Ba

在家测试和数据收集gydF4y2Ba

在家里收到流感试剂盒后，参与者被指示完成一份关于REDCap的调查问卷(通过电子邮件发送)。这包括关于他们的症状和暴露风险的问题，包括住房、健康状况、最近的旅行和人口统计(gydF4y2Ba多媒体附录1gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

参与者被要求将eft应用程序下载到他们的蓝牙设备上。该应用程序提供了一个教学视频，然后在屏幕上逐步说明如何使用随附的定制中鼻甲拭子自行收集样本。参与者被指示在他们的两个鼻孔的鼻腔周围插入和旋转棉签3次。然后将拭子样本放入缓冲液中，将缓冲液加入分析仪，等待12分钟处理样本。然后分析仪通过蓝牙和安全研究数据库将测试结果直接发送到用户设备上的EHFT应用程序。由于参与者使用的是实验研究设备，他们对eft测试结果是不知情的。参与者收到了gydF4y2Ba谢谢你！gydF4y2Ba一旦他们的样本被处理，就会在EHFT应用程序中显示屏幕，指示他们参考研究说明来完成参考样本，如果他们担心自己的症状，就联系他们的医疗保健提供者。gydF4y2Ba

参与者还被要求使用流感试剂盒中的棉签获得第二根中鼻甲棉签，遵循快速入门指南和REDCap调查(gydF4y2Ba多媒体附录1gydF4y2Ba)。他们被指示将棉签插入鼻孔的一半(约1英寸)，按压鼻孔，旋转5次。然后，他们被指示将棉签放入收集管，重新包装所有组件，以符合美国装运生物物质的规定(UN3373 B类)[gydF4y2Ba23gydF4y2Ba]，然后通过美国邮政服务寄回华盛顿大学的研究实验室。gydF4y2Ba

参与者在登记后7天接受了随访调查，其中包括他们的疾病持续时间和严重程度，最近的旅行以及对研究团队的反馈(gydF4y2Ba多媒体附录1gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

参考测试gydF4y2Ba

对实验室收到的退回试剂盒进行了检查，并记录了样品或包装损坏的任何证据。样品分成2份，每份1 mL，一份在- 80℃冷冻，另一份在4℃保存，待提取。所有的样品都是一式两份。使用Magna Pure 96小体积总核酸提取试剂盒(产品编号06543588001;罗氏公司)。使用TaqMan OpenArray平台(Thermofisher)进行qRT-PCR检测纯化的总核酸对一组呼吸道病原体的作用。OpenArray面板包括甲型流感H3N2、甲型流感H1N1和泛甲型流感探针序列;乙型流感;丙型流感;呼吸道合胞病毒(RSV) A和B; human coronavirus 229E, NL63, OC43, and HKU1; adenovirus; human rhinovirus; human metapneumovirus; human parechovirus; enterovirus A, B, C, D, D68, and G; human bocavirus; and链球菌引起的肺炎gydF4y2Ba，gydF4y2Ba肺炎支原体gydF4y2Ba,gydF4y2Ba衣原体肺炎gydF4y2Ba．OpenArray面板还包括人类基因核糖核酸酶P (RNase P)探针，作为样品质量的指标。所有定量数据被捕获为相对周期阈值(Crt)值，该值比等效的定量聚合酶链反应周期阈值大约少10个周期。gydF4y2Ba

在解释参考测定时，实验室人员无法获得EHFT结果或临床信息。如果qRT-PCR在40个聚合酶链反应(PCR)周期内产生通道特异性病原体的荧光信号，则认为参考试验为病原体阳性gydF4y2Ba．gydF4y2Ba参与者无法看到eft或实验室结果。gydF4y2Ba

2020年5月，在完成数据收集后，参与者被问及是否愿意选择接收参考拭子的结果。如果参与者选择结果，他们的样本的第二等分被解冻并使用临床实验室改进修正案豁免的GeneXpert Xpress(造父变星)进行测试gydF4y2Ba专家快车流感/RSVgydF4y2Ba墨盒，按照制造商的说明。造父变星的结果区分了甲型流感、乙型流感和RSV。如果检测到流感或呼吸道合胞病毒，会通知参与者。此外，如果在参考样本中检测到SARS-CoV-2，在3月4日至3月9日期间同意参加研究的参与者将得到实时通知。gydF4y2Ba

数据分析gydF4y2Ba

绘制了参与者流程图，展示了研究中的每个主要步骤和参与者的退出情况。计算参与者人口统计学、危险因素、ARI症状、症状严重程度和其他检测到的病原体的汇总统计数据。对参考检测阳性(PCR阳性)和阴性(PCR阴性)受试者的危险因素、症状存在和症状严重程度进行Pearson卡方检验，并进行Yate连续性校正。gydF4y2BaPgydF4y2Ba值<。0.05认为有统计学意义。我们以自我报告的症状出现日期和完成EHFT的确切时间之间的差值来计算症状的出现。参与者被指示在服用EHFT后立即收集参考拭子。gydF4y2Ba

我们计算了指数测试(EHFT)与参考测试(OpenArray qRT-PCR)的总体性能的敏感性、特异性和阳性和阴性似然比(95% CI)，并独立计算了甲型和乙型流感的敏感性、特异性和阳性和阴性似然比(95% CI)。此外，我们按先前显示影响病毒载量的亚组分析了数据[gydF4y2Ba24gydF4y2Ba-gydF4y2Ba26gydF4y2Ba]，即检测前的症状发作和疾病严重程度，以症状总数(1-9个症状)和疾病造成的日常生活中断来衡量(1-5量表，1表示完全没有，5表示非常严重)。对于每个亚组，我们以95% CI计算敏感性、特异性以及阳性和阴性似然比。我们对亚组间活动的平均影响水平进行两两比较，采用单因素方差分析和Tukey诚实显著差异检验。适当时，计算Pearson相关性。gydF4y2Ba

平均流感Crt值被用作相对病毒载量的代理;较低的Crt值对应较高的病毒载量，因此产生足够的OpenArray信号所需的周期较少[gydF4y2Ba27gydF4y2Ba]。每增加一个Crt周期，就相当于病毒RNA基因组拷贝减少大约2倍。计算以下亚组的均值和标准差:症状发作、流感亚型、儿童和成人(5-17岁vs≥18岁)、真阳性(TP)与假阴性(FN)亚组。使用学生双尾进行各组平均流感Crt的两两比较gydF4y2BatgydF4y2Ba测试。分别拟合多个线性回归模型，将平均Crt值作为症状发作的函数，根据年龄和症状数量及其对日常活动的影响程度进行调整，并根据年龄和症状发作进行调整。gydF4y2Ba

RNase P Crt值作为参考样品质量指标;较低的阴极射线管值表示样本中有较多的内源性人类DNA，表明较有可能在拭子上收集到足够的物质[gydF4y2Ba25gydF4y2Ba，gydF4y2Ba28gydF4y2Ba，gydF4y2Ba29gydF4y2Ba]。采用Kruskal-Wallis秩检验和Dunn多重比较后验检验，并采用Holm-Bonferroni校正，比较各年龄组之间以及TP、假阳性(FP)、FN和真阴性检测结果亚组之间的RNase P Crt中位值。采用Mann-Whitney比较pcr阳性组和pcr阴性组、流感a阳性组和流感b阳性组、儿童(≤18岁)和成人(>18岁)组的RNase P Crt中位值gydF4y2BaUgydF4y2Ba测试。gydF4y2Ba

缺失或不确定EHFT或参考样本的参与者从分析中删除。采用R (version 1.3.1056;R统计计算基础)[gydF4y2Ba30.gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

结果gydF4y2Ba

招募和保留参与者gydF4y2Ba

共有958名参与者符合纳入标准(gydF4y2Ba图1gydF4y2Ba)，其中780人(81.4%)填写了同意书，提供了可行的收货地址，并获得了一个流感工具包。在这780名接受试剂盒的参与者中，630人(80.8%)完成了指数测试。排除在症状出现后34天完成指数测试的1名个体。在完成指标测试的630名参与者中，605名(96%)将参考样本返回实验室，并纳入我们的分析。最后纳入本分析的研究样本是605名完成了指数和参考测试的参与者。gydF4y2Ba

大多数参与者是通过Facebook、Instagram或Twitter上的广告招募的(184/605,30.4%);朋友或家人介绍(181/605,29.9%);其他网络媒体(138/605,22.8%)。与其他招聘方法相比，谷歌广告和医疗保健提供者推荐招募了更多的流感阳性参与者。gydF4y2Ba

‎gydF4y2Ba 查看此图gydF4y2Ba

参与者人口gydF4y2Ba

大多数参与者年龄在25-44岁之间，女性，白人，完成了学士学位或以上(gydF4y2Ba表1gydF4y2Ba)。大多数人都有私人医疗保险，接种了2019年的流感疫苗，并且不吸烟。年龄(gydF4y2BaPgydF4y2Ba=.02)和教育(gydF4y2BaPgydF4y2Ba=.02)与流感PCR检测阳性显著相关;然而，接种2019-2020年流感疫苗与流感PCR检测阳性无关。报告的最常见症状为疲劳(438/605,72.4%)、喉咙痛(414/605,68.4%)、咳嗽(355/605,58.7%)、头痛(342/605,56.5%)和发烧(292/605,48.3%);gydF4y2Ba表2gydF4y2Ba)。发烧、咳嗽、发冷或发抖、出汗、恶心或呕吐、肌痛等gydF4y2BaPgydF4y2Ba值<.001)，疲劳度(gydF4y2BaPgydF4y2Ba=.007)，流鼻涕(gydF4y2BaPgydF4y2Ba=.04)，呼吸困难(gydF4y2BaPgydF4y2Ba=.05)均与PCR检测阳性显著相关。流感PCR阳性的参与者也更有可能报告中度或重度发烧(gydF4y2BaPgydF4y2Ba<.001)，咳嗽(gydF4y2BaPgydF4y2Ba<.001)，疲劳(gydF4y2BaPgydF4y2Ba<.001)，肌痛(gydF4y2BaPgydF4y2Ba<.001)，喉咙痛(gydF4y2BaPgydF4y2Ba=.04)。TaqMan OpenArray检测出30.7%(186/605)的参与者除流感外呼吸道病原体≥1种呈阳性，其中一些与甲型或乙型流感合并感染(gydF4y2Ba多媒体附录2gydF4y2Ba)。除流感外，最常见的呼吸道病原体为鼻病毒(77/186,41.2%)和季节性人冠状病毒(50/186,26.9%)。gydF4y2Ba

几乎所有(604/605,99.8%)参与者在症状出现后15天内完成了EHFT(范围0.6-14.4天;gydF4y2Ba多媒体附录2gydF4y2Ba)，从症状出现到eft检测的平均时间为2.9 (SD 1.5)天。在605名参与者中，344名(56.9%)在症状出现后72小时(3天)内服用EHFT, 249名(41.2%)在症状出现后4至7天内服用，12名(1.9%)在症状出现后8至15天内服用。症状发作和EHFT检测之间的最长中位数时间间隔段是症状发作和入组之间(中位数48小时)，而从入组到试剂盒运送(中位数1.25小时)和试剂盒运送到检测(中位数5.33小时)的时间间隔段是最长中位数时间间隔段。gydF4y2Ba

RDT的精度gydF4y2Ba

在605名参与者中，87名(14.4%)参与者使用参考测试流感检测呈阳性(70/ 87,80%为甲型流感，17/ 87,20%为乙型流感)。与参考测试相比，EHFT的总体敏感性和特异性分别为61% (95% CI 50-71)和95% (95% CI 93-97)gydF4y2Ba表3gydF4y2Ba用于精度值)。EHFT对甲型流感的敏感性和特异性分别为60% (95% CI 48-72)和99% (95% CI 98-100)，对乙型流感的敏感性和特异性分别为65% (95% CI 38-86)和96% (95% CI 94-98)。乙型流感产生较高的FP测试率，导致阳性预测值(PPV)为33% (95% CI 18-52)。gydF4y2Ba

基于从症状出现到进行EHFT时间的准确性亚组分析(gydF4y2Ba表3gydF4y2Ba在症状出现≤72小时时，A型流感检测的敏感性和特异性分别为62.5% (95% CI 48-77)和100% (95% CI 98-100)，而在>72小时时，它们分别为57% (95% CI 37-75)和99% (95% CI 97-100)。B型流感在≤72小时的敏感性和特异性分别为64% (95% CI 31-89)和95% (95% CI 92-97)，而在>72小时的敏感性和特异性分别为67% (95% CI 22-96)和98% (95% CI 95-99)。gydF4y2Ba

疾病严重程度与eft敏感性之间没有关联(gydF4y2Ba多媒体附录3gydF4y2Ba)。症状的数量和日常活动的中断与EHFT敏感性均无显著关联，这些指标与平均流感Crt之间也没有显著关联。然而，疾病严重程度的测量是相互相关的;那些报告日常活动受到更多干扰的人也报告了更多的症状(gydF4y2BargydF4y2Ba= 0.54;gydF4y2BaPgydF4y2Ba<.001)， PCR阳性的个体在这两项指标上的得分明显高于PCR阴性的个体(gydF4y2BaPgydF4y2Ba<措施;gydF4y2Ba多媒体附录3gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

在25例FP结果中，22例(88%)发生在EHFT显示存在乙型流感时，且均发生在症状出现后96小时内(gydF4y2Ba多媒体附录3gydF4y2Ba)。其他呼吸道病原体，即RSV、人偏肺病毒gydF4y2Ba，gydF4y2Ba人类冠状病毒gydF4y2Ba，gydF4y2Ba和gydF4y2Ba链球菌引起的肺炎gydF4y2Ba，在32%(7/22)的乙型流感FP样本中检出。gydF4y2Ba

流感CrtgydF4y2Ba

所有流感pcr阳性样本的平均流感Crt值为18.82，在症状出现后≤72小时采集的样本(17.9,SD 4.4)显著低于在症状出现后>72小时采集的样本(20.14,SD 4.2;gydF4y2BaPgydF4y2Ba= .02点;gydF4y2Ba表4gydF4y2Ba)。TP患者的平均流感Crt值(16.8,SD 4.0)显著低于FN (gydF4y2BaPgydF4y2Ba<措施)。B型流感的平均Crt值(16.7,SD 4.4)也显著低于A型流感(19.3,SD 4.3;gydF4y2BaPgydF4y2Ba= .04点)。多元回归估计，症状出现后每多一天，平均Crt增加1.34 (95% CI 39-2.29) Crt (gydF4y2BaPgydF4y2Ba=.006)， Crt值随症状数量的增加而降低(gydF4y2BaPgydF4y2Ba= .03点;gydF4y2Ba多媒体附录4gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

研究程序和标本质量的用户体验gydF4y2Ba

总的来说，参与者表示他们是gydF4y2Ba有点自信gydF4y2Ba(216/560, 38.5%)或gydF4y2Ba非常有信心gydF4y2Ba(337/560, 60.1%)，他们正确地完成了参考拭子，只有轻微的不适(431/560,76.8%;gydF4y2Ba多媒体附录5gydF4y2Ba)。这与eft类似，参与者表示他们是gydF4y2Ba有点自信gydF4y2Ba(188/567, 33.5%)或gydF4y2Ba非常有信心gydF4y2Ba(371/567, 66.1%)和轻度不适(427/567,76.1%)。只有0.3%(2/567)的参与者报告了EHFT设备的蓝牙组件的错误，并发送了新设备。该设备没有其他问题报告给研究小组。gydF4y2Ba

参考样本RNase P Crt值范围为10.89 ~ 33.3周期(中位数21.1,SD 4.3, IQR 16.7 ~ 24.1)。流感阳性样本(中位数22.7,SD 4.32)和流感阴性样本(中位数20.7,SD 4.32;gydF4y2BaPgydF4y2Ba=.05)或根据年龄或流感亚型(gydF4y2Ba多媒体附录5gydF4y2Ba)。所有样本的Rnase P Crt值远低于40周期截止值，只有4个>30(31.5,32.4,32.5和33.3)。所有亚组评估的中位数均在推荐的28 Crt质量范围内[gydF4y2Ba31gydF4y2Ba]。没有样本因其RNase P Crt值而被排除。gydF4y2Ba

在7.8%(46/587)的返回试剂盒中，有≥1个错误，表明这些参与者没有正确地遵循≥1个提供的指示。在这46个试剂盒中，23个(50%)因包装错误(缺少外盒或标本袋密封不正确)而返回，27个(59%)因VTM管上的标签错误而返回(gydF4y2Ba多媒体附录5gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

讨论gydF4y2Ba

主要研究结果gydF4y2Ba

本研究证明了实施无监督家庭诊断测试的可行性。绝大多数参与者能够在没有直接监督的情况下完成评估家庭流感测试所需的多种程序，包括调查、两次中鼻甲拭子、完成流感RDT的应用程序指导，以及通过邮件将参考样本返回到中心实验室。本研究样本中流感病毒阳性率为14.4%(87/605)，其中甲型流感病例占80%(70/87)，这与研究期间当地报告的流感病毒株流行率和相对比例一致[gydF4y2Ba32gydF4y2Ba]。与自采拭子的实验室PCR相比，EHFT具有中等灵敏度(61%)和高特异性(95%)。A型流感的特异性(99%)略高于B型流感(96%)，而B型流感的敏感性(65%)略高于A型流感(60%)，尽管ci很宽且重叠。当与甲型流感(68%)独立分析时，乙型流感PCR阳性的参与者比例小，乙型流感FPs的比例高，导致乙型流感的PPV低得多(33%)。gydF4y2Ba

TP EHFT结果的流感Crt值明显低于FN EHFT结果(对应于较高的病毒载量)，表明较低的病毒载量可能影响了EHFT的敏感性。为了进一步研究这种关系，我们评估了EHFT在已知影响病毒载量的另外两个变量中的准确性，即症状发作和疾病严重程度[gydF4y2Ba24gydF4y2Ba-gydF4y2Ba26gydF4y2Ba，gydF4y2Ba33gydF4y2Ba，gydF4y2Ba34gydF4y2Ba]。EHFT敏感性与症状发作相关，在症状发作后72小时内进行测试，敏感性有中度改善(6%)。此外，我们注意到症状发作与Crt值之间存在线性关系，在症状发作和检测之间每增加一天，病毒估计数量平均增加1.3个周期(即减少2倍以上)。相比之下，疾病严重程度似乎也没有影响EHFT的敏感性，没有观察到测试准确性和症状数量之间的关系，也没有对日常活动产生更大的影响。然而，这两种疾病严重程度的测量是相互关联的，这与报告更多症状的个体面临更大的日常活动中断的预期是一致的。值得注意的是，尽管在本研究中没有预测病毒载量，但PCR阳性个体的两种流感严重程度测量值都明显高于PCR阴性个体。gydF4y2Ba

我们没有发现任何证据表明自我抽样的质量会影响EHFT的准确性，或者特定的人口群体比其他人更有能力收集自我拭子。相反，我们发现阴性参考拭子的RNase P Crt值低于阳性样本。如果样品质量影响参考拭子，我们预计相反的阴性参考拭子质量较差，因此RNase P Crt值较高。中位数RNasegydF4y2BaPgydF4y2Ba测试精度子组的值完全在可接受的范围内。gydF4y2Ba

与以往研究比较gydF4y2Ba

我们报道的EHFT的准确性与其他流感rrt相当。2017年对134项流感rdt研究的荟萃分析显示敏感性(61%，95% CI 53.3-68.3)和特异性(98.9%，95% CI 98.4-99.3) [gydF4y2Ba14gydF4y2Ba与本研究报告的结果相当。这些结果与另外两项荟萃分析的结果一致[gydF4y2Ba10gydF4y2Ba，gydF4y2Ba14gydF4y2Ba]。考虑到已发表的关于流感RDT准确性的研究是在卫生保健环境中进行的，抽样和RDT是由卫生保健工作者和研究人员而不是患者自己进行的，因此测试准确性的相似性就更加值得注意。gydF4y2Ba

从症状出现到检测或症状出现的时间对病毒载量和流感RDT准确性具有关键影响[gydF4y2Ba13gydF4y2Ba，gydF4y2Ba35gydF4y2Ba]。邮寄检测试剂盒的缺点之一是，由于需要时间分发拭子材料，在症状出现后检测延迟[gydF4y2Ba16gydF4y2Ba，gydF4y2Ba36gydF4y2Ba]。Elliot等[gydF4y2Ba36gydF4y2Ba]报告症状出现和自拭之间平均间隔4天，而临床采集的样本为2天。同样，我们发现流感Crt随着症状出现时间的延长而下降[gydF4y2Ba36gydF4y2Ba]。从发病到检测的平均时间较短的研究往往报告较高的敏感性值[gydF4y2Ba13gydF4y2Ba]。相比之下，一项研究发现，过早检测可能导致FNs增加，主要是如果在症状出现后12小时内使用RDT [gydF4y2Ba15gydF4y2Ba]，暗示可能存在gydF4y2Ba甜点gydF4y2Ba流感RDT检测必须与影响检测灵敏度的其他因素相平衡。此外，我们没有发现病毒脱落和疾病严重程度之间的关系[gydF4y2Ba24gydF4y2Ba-gydF4y2Ba26gydF4y2Ba，gydF4y2Ba33gydF4y2Ba，gydF4y2Ba34gydF4y2Ba]。这可能是因为我们使用的疾病严重程度的测量方法在我们的环境或人群中缺乏有效性，而且我们的人群中疾病严重程度的范围太窄。对病毒载量动态，特别是在病情不太严重的人群中，有了更有力的了解，将有助于确定在家进行流感RDT治疗最合适的条件。gydF4y2Ba

自采拭子的质量似乎不影响eft的准确性。参与者报告对完成eft拭子和参考测试拭子都有很高的信心。此外，参考拭子的RNase P Crt值(校正为等效周期阈值时)往往较高，但在其他临床收集和自行收集中鼻甲拭子的研究中报告的范围内[gydF4y2Ba28gydF4y2Ba，gydF4y2Ba37gydF4y2Ba]。eft擦拭说明要求参与者擦拭两个鼻孔。参考拭子的RNase P Crt值较低的一个可能解释是，在EHFT拭子之后完成，可用于收集的人类细胞碎片较少。这可能也影响了流感Crt值。虽然RNase P Crt在个体之间存在差异，但在TP、FN、FP和真阴性组之间没有观察到差异，这表明样本收集不影响eft的准确性。gydF4y2Ba

我们发现EHFT对乙型流感(包括FP结果)的准确性较低，这与其他文献一致[gydF4y2Ba38gydF4y2Ba-gydF4y2Ba40gydF4y2Ba并可能是由几个因素造成的。在研究期间，研究集水区的乙型流感流行率较低(3%-4%)[gydF4y2Ba32gydF4y2Ba];已知低患病率会影响预测值[gydF4y2Ba41gydF4y2Ba，gydF4y2Ba42gydF4y2Ba]。其他有关流感RDTs的研究亦指出，乙型流感的FPs比率高于甲型流感[gydF4y2Ba38gydF4y2Ba-gydF4y2Ba40gydF4y2Ba]，提示与用于乙型流感检测的抗体具有非特异性反应性。gydF4y2Ba

优势与局限gydF4y2Ba

这是第一个报告无监督参与者使用的流感RDT准确性的研究之一，也是第一个报告专门为家庭使用设计的RDT准确性的研究。我们的研究设计包括基于网络的远程招募、运送带有RDT和参考样本收集材料的流感试剂盒，以及在没有研究人员直接监督的情况下由用户完成研究的所有阶段。研究程序的高响应率和完成率(605/780,77.6%)与EHFT和参考样本程序的高自我报告信心相匹配。有22.4%(175/780)的参与者退出，他们收到了一个工具包，但没有参与;尚不清楚这是否引入了额外的偏倚，但与其他基于邮件的测试研究一致[gydF4y2Ba43gydF4y2Ba]。尽管在所需的运输过程中偶尔会出现错误，但绝大多数样品都在适当的条件下返回研究实验室。参与者的症状可能比那些参加临床设置的人更轻，尽管这可能影响了RDT的敏感性，病毒脱落较低，但他们代表了将使用RDT的人群。我们的研究结果支持这种类型的研究设计，用于评估流感和其他呼吸道病毒(如SARS-CoV-2)的自我检测。gydF4y2Ba

这项研究有几个局限性。首先，参与者受教育程度更高，会说英语，有私人保险和医疗服务，能够使用蓝牙移动应用设备。未来的研究可能会通过本研究中使用的社交媒体广告之外的各种招聘方法来解决这一限制;然而，这种类型的研究设计依赖于基于互联网和应用程序的数据收集，这本质上限制了研究人群。其次，许多个体(261/605,43.1%)没有在发病72小时内进行EHFT，这可能是因为招募、试剂盒运输和参与者在收到时完成EHFT的时间过去了。未来的家庭测试研究应该探索解决方案，在他们的疾病早期识别有症状的个体，并方便地提供测试。例如，队列研究通过短信或电子邮件定期进行自我报告的症状调查，以及早发现流感并及时进行检测[gydF4y2Ba44gydF4y2Ba，gydF4y2Ba45gydF4y2Ba或通过预先放置流感试剂盒或其他家庭检测设备。第三，尽管参与者报告了自己收集拭子的信心，这些样本中的人类DNA标记物证实了这一点，但这种参考样本的有效性仍然存在一些不确定性。最后，由于当地COVID-19大流行导致研究开始延迟和过早结束，我们招募的样本量不到所需样本量的三分之一(并且只有少数乙型流感感染)。更大的样本量将提供更严格的ci，以估计测试的准确性。此外，我们招募的社区中SARS-CoV-2的传播可能影响了EHFT的准确性。入组标准旨在针对ARI，因此可能偶然招募了症状与流感相似的COVID-19患者gydF4y2Ba．gydF4y2Ba不幸的是，由于我们实验室与县公共卫生办公室共同实施的隐私协议，我们无法分析SARS-CoV-2的参考样本，也无法确定它可能对EHFT准确性产生的影响。根据这段时间SARS-CoV-2的血清阳性率[gydF4y2Ba46gydF4y2Ba]，西雅图地区传播的COVID-19病例似乎不太可能导致测试成绩大幅下降，尽管它可能对ARI的PPV产生了很小的影响。gydF4y2Ba

对临床医生、研究人员和政策制定者的启示gydF4y2Ba

为家庭使用而设计的rdt有可能在柜台购买或由卫生保健提供者开处方，并在必要时与面对面或远程医疗咨询相结合，以指导护理[gydF4y2Ba47gydF4y2Ba]。本文报告的流感EHFT的准确性与临床环境中使用的许多随机对照试验相似，这支持其在类似人群中使用，前提是采取适当的预防措施，特别是降低FN结果的风险。这可能包括使用临床预测规则来帮助潜在的RDT用户量化他们患流感的前测概率。我们的研究结果支持在症状出现72小时内的个体中使用EHFT，并建议需要进一步研究以了解病毒载量的其他指标，这些指标可用于选择是否推荐使用这种类型的RDT的个体。gydF4y2Ba

我们的研究设计为在家庭环境中对流感和其他呼吸道病原体(包括SARS-CoV-2)进行rdt的比较准确性研究提供了一个模型。我们建议未来的研究设计优先考虑减少从症状出现到研究入组进行指数测试的时间，特别是对于流感等感染，在症状出现后病毒脱落迅速下降。策略可包括预先放置检测试剂盒和鼓励在发病时尽早完成RDT。鉴于流感严重程度和病毒载量之间潜在的重要关系(因此自检敏感性)，我们也鼓励使用更准确的方法来测量自我报告调查的疾病严重程度。最后，揭示自我测试结果不会使参与者对RDT结果视而不见，反而会促进招募，并允许探索自我测试阳性和阴性结果对参与者寻求健康和其他行为的影响。gydF4y2Ba

结论gydF4y2Ba

采用完全基于社区的远程招募研究设计，我们的研究结果显示EHFT与临床环境中使用的许多流感rdt具有相当的准确性。然而，EHFT的敏感性仅为中等，如果在症状出现后72小时内使用该测试，则灵敏度更高，此时病毒脱落可能最高。我们的研究结果支持一种新形式的试验设计，在这种设计中，招募和自我抽样参考测试可以由将实施这些测试的社区和人群中的非专业用户成功执行。这种研究设计可用于评估其他病毒性呼吸道病原体(如SARS-CoV-2和RSV)检测的准确性。家庭检测有可能扩大传染病检测的可及性，对个人和医疗保健系统都有潜在的好处。gydF4y2Ba