ROBOKOP是一个基于生物医学KG的问答系统，由前端用户界面(UI)和后端KG组成，两者都是公开可用的[ 12- 15］．ROBOKOP KG采用Biolink模型[ 16]作为一种高级本体，它可以应用于将领域知识表示为生物医学实体之间的关系图。ROBOKOP KG目前包含600万个节点和1.4亿条边，其中节点代表广泛的生物实体，如基因、生物过程、解剖特征、疾病和表型，而边代表谓词，如 与， 原因, 增加表达．ROBOKOP KG来自30多个精心策划的生物医学数据源( 多媒体附件1)已集成到图形结构( 图1)．经过筛选的数据源是公开可用的，可以通过直接导入到本地Neo4j实例进行访问。有些数据源只是部分完整和/或需要预处理。

ROBOKOP用户界面允许用户提出查询，并快速探索排名和得分的答案集或子图。ROBOKOP查询是元图[ 17- 19中所示实体类型的问题图 图1．元图或机器问题有一个一般的结构，由用户在感兴趣的高级问题的基础上定义。用户可以选择节点作为命名实体，指定为CURIE(紧凑统一资源标识符)或仅指定为实体类型。下拉菜单为用户提供了对自由文本节点条目的选择。答案被构造为在拓扑和类型上匹配查询的子图，以及节点和边的任何所需属性。

一个给定的查询通常会产生许多答案或子图，特别是对于没有多少关于节点和边的规范或有多个节点和边的查询。因此，根据与查询的相关性对子图进行排序以及支持证据的强度对于用户探索结果至关重要。ROBOKOP答案排序算法[ 13]使用基于同时引用源节点和目标节点的PubMed摘要数量的度量对每个子图中的每条边进行加权。发布支持和谓词断言由用于创建KG ( 多媒体附件1)．另一项名为OmniCorp的ROBOKOP服务提供出版支持[ 20.]，它包含了一个PubMed标识符图，这些标识符链接到在摘要中引用的概念(即ROBOKOP KG中的潜在节点)。OmniCorp是通过使用SciGraph命名实体识别应用程序编程接口处理所有PubMed摘要构建的。 21并将标题和摘要中的文本与预定的生物本体中的概念相匹配。ROBOKOP答案排序算法根据答案子图的叶子之间的距离为每个答案子图计算一个置信分数，将边缘权重视为电阻，由欧姆定律定义[ 22］．发表次数越多的答案子图排名越高，来自策划知识来源的发表次数比来自OmniCorp提供的发表共现的发表次数更重要。信心分数随后增加了“信息量”分数，其灵感来自NAGA评分模型[ 23)，并处理更具体的新断言(例如， 疾病X与基因相互作用 NPC1)，比一般的断言(例如， 疾病X与免疫系统相互作用)．

ROBOKOP KG也可以直接查询，独立于UI，使用Cypher查询语言[ 24]在KG中查找与查询结构匹配的子图。示例Cypher查询可在网上找到[ 15］．

EPR是一项对近2万名当前参与者的研究，旨在更好地了解环境暴露与健康和疾病的遗传决定因素之间的相互作用[ 25］．该登记簿包含有关参与者接触和疾病史的调查数据，以及DNA样本和其他生物测量数据。作为更广泛努力的一部分，调查人员一直在探索工作场所暴露对imd的影响。

IMD定义为自我报告的过敏反应(过敏性鼻炎、花粉热或季节性过敏;过敏(季节性除外));哮喘状态;或自身免疫性疾病(牛皮癣、甲状腺疾病[非癌症]、甲状腺功能亢进、甲状腺功能减退、克罗恩病、多发性硬化症、乳糜泻、干燥病、类风湿性关节炎、溃疡性结肠炎、硬皮病或系统性硬化症、恶性贫血、肌炎或狼疮)。EPR调查数据提取于2018年12月。总样本量为4574名参与者。

进行了探索性分析，以检查每种IMD与具体工作场所化学品之间的关系，这些化学品被分为18类( 多媒体附件2)．这些化学品的调查问题来自EPR“暴露调查- A部分:外部暴露，B部分:工作中的化学和金属暴露”，一般结构如下:“请选择任何一个 重金属你所接触过的 每周锻炼15分钟以上在你做过的任何工作中(选择所有适用的)。”当样本量由于数据缺失或阳性病例很少而较小时，使用卡方分析或Fisher精确检验来检查工作场所化学品暴露与个体imd之间的关联。错误发现率校正应用于关联试验。化学药品分别检查，也按化学班级检查。具有下限和上界的比值比(or)按惯例计算，且不因样本量小而进行调整。由于这是一个探索性分析，显著性水平设置为 α=。05或。10，我们没有控制潜在的协变量，如年龄，性别和种族。

共有45个暴露- imd相关性在 P<。10，with 20 associations significant at P<。05after false discovery rate correction. In all cases, workplace chemical exposures were associated with increased odds of self-reported IMD ( 多媒体)．染料是与IMD相关的最常见的工作场所暴露类别。没有发现酸或胶水/粘合剂与IMD条件之间的关联。“过敏或过敏反应(季节性过敏除外)”和“过敏性鼻炎、花粉热或季节性过敏”是与工作场所化学品接触相关的最常见的IMD状况。

我们使用三个典型关联来突出ROBOKOP应用程序，选择这些关联是因为它们在 P<。05，evident at both the level of the specific chemical and the chemical class, and representative of different chemical classes and IMDs: (1) carbon monoxide-multiple sclerosis, (2) ammonia-asthma, and (3) isopropanol-allergic rhinitis, hay fever, or seasonal allergies. An overview of ROBOKOP results for each of these examples is provided below, with various functionalities of the interactive UI highlighted in the first example.

我们在EPR队列中确定了工作场所化学品暴露与IMD状况之间的45个显著相关性，其中20个相关性在 P<。05而且largely unexpected a priori. Statistical evidence for an association, while important, does not establish a causal relationship or provide any insights into underlying mechanisms. Thus, we applied the open ROBOKOP KG system to validate the observed associations by demonstrating plausible connections between exposures and IMD conditions, and we provide mechanistic insights or hypotheses to explain them. We highlighted the following three use case applications: carbon monoxide-multiple sclerosis, ammonia-asthma, and isopropanol-allergic disease.

ROBOKOP为一个以一氧化碳-基因-多发性硬化症为结构的问题确定了合理的答案子图，从而支持了工作场所暴露于一氧化碳和多发性硬化症之间的统计关联。ROBOKOP进一步鉴定了编码TNF的基因， 肿瘤坏死因子，作为几种潜在的中介基因之一。ROBOKOP元数据和出版物支持表明，血红素氧化酶-1(将血红素氧化为胆红素和一氧化碳)起中介作用[ 26］．血红素氧合酶-1水平在多发性硬化症患者中降低，并在疾病加重期间进一步降低[ 30.]，而外源性一氧化碳或释放一氧化碳或诱导血红素氧合酶-1的化学物质似乎对多发性硬化症的实验模型有治疗作用[ 31］．这些结果表明血红素氧合酶-1， 通过一氧化碳具有体内平衡或抗炎作用，可以预防多发性硬化症或抑制疾病恶化。然而，最近的证据表明，胶质细胞中的慢性血红素加氧酶-1反应可能促进神经退行性变，从而加剧多发性硬化症和其他神经退行性疾病[ 32］．

ROBOKOP返回的多个答案子图支持了工作场所氨暴露和哮喘之间的统计关联。编码ADA的基因， 艾达ROBOKOP将其确定为这种关系的几个潜在中间体之一。ROBOKOP元数据表明ADA通过将腺苷转化为肌苷和氨来代谢腺苷。ROBOKOP发现了一些出版物，表明两者之间存在关联 艾达突变与哮喘、过敏和免疫功能，包括一篇表明与阿斯匹林不耐受哮喘有关的出版物[ 27］．最近的一项综述表明，ADA缺乏可能对多个器官系统产生不利影响，包括肺系统[ 33］．一些较早的出版物表明，腺苷在哮喘患者中起着支气管收缩剂的作用[ 34]，最近的一篇文章表明，接触氨与哮喘加重之间存在关联[ 35］．这些结果支持了一种关系 艾达突变与肺部并发症，以及氨与已确诊呼吸系统疾病患者肺部并发症之间的关联。

ROBOKOP提供了几个答案子图来支持工作场所暴露于异丙醇和过敏性疾病之间的统计关联。编码IL6的基因 白细胞介素6，被ROBOKOP鉴定为几个潜在的中介基因之一，发表的支持表明参与先天免疫反应[ 28］．此外，ROBOKOP还发现了一些文献支持，表明IL6参与了过敏性疾病的神经免疫和神经行为相关[ 29］．虽然IL1被广泛认为在“疾病行为”中发挥着突出作用，但IL6似乎也发挥着作用[ 36， 37］．这些发现表明，异丙醇暴露与过敏性疾病之间的关系实际上可能反映了异丙醇与过敏性疾病的神经/神经行为相关因素之间的关系。具体来说，结果表明异丙醇可能引发先天性神经免疫反应，导致il - 6水平升高，进而可能引发过敏性疾病的神经行为症状。

ROBOKOP有几个限制，在解释这里的结果或使用应用程序时应该考虑这些限制。首先，工作场所化学品暴露和IMD之间的许多关联涉及复杂的化学混合物，如“调色剂”、“传动液”和“机油”。ROBOKOP目前将这些实体映射到医学主题标题术语，但该应用程序没有适当的方法来将这些混合物映射到构成给定混合物的单个化学品。我们正在考虑克服这一限制的方法。其次，ROBOKOP，像所有基于KG的应用程序一样，受到KG完成的挑战的限制。例如，如果在ROBOKOP KG基础上的策划数据源之一没有建立暴露-基因关系，那么这种关系将不会被识别。我们正在开发算法，通过推断KG中的边来克服这一限制，但目前，这仍然是一个限制。第三，ROBOKOP断言的证据来自以下两个主要来源:(1)用于创建KG的策展知识来源和(2)PubMed摘要中术语的共现。用于对答案子图进行排名的排名和评分算法是基于这两个证据来源，第一个来源比第二个来源更重要。其他相关因素，如发表日期和主题的研究数量(相对于出版物)，目前没有考虑，但可能会被纳入应用程序的未来版本。 Fourth, as a prototype system, ROBOKOP does not yet support natural language processing capabilities or other sophisticated approaches to aid users. We encourage users to contact the developers and/or post GitHub issues should they encounter any challenges when generating queries and/or evaluating answer subgraphs. Fifth, while not a limitation of ROBOKOP itself, the workplace chemical exposure–IMD associations reported here were derived from survey data (ie, participant self-report) and were not confirmed by clinical record review or expert judgement. As such, the potential exists for misclassification and/or bias in both the reported exposures and the reported IMDs. Moreover, the timing between workplace exposure and the onset of IMD cannot be determined due to limitations of the survey design and participant recollection at the time the survey was administered. Finally, as this was an exploratory analysis, we did not adjust the ORs for small sample sizes or control for potential covariates such as age, sex, and race.

ROBOKOP在支持现实世界观察和产生机械假设方面展示了其潜力。在本文中，我们重点研究了工作场所化学品暴露与IMDs之间的显著关联，这是一项更大的EPR研究的一部分。然而，我们注意到ROBOKOP还有其他用途。事实上，ROBOKOP的一个关键特征是它作为一个通用的问答系统在生物医学领域的通用性，具有支持各种机器问题的能力。例如，我们正在使用ROBOKOP来探索药物和临床结果之间的关联，包括不良事件，使用来自电子健康记录的数据。我们还在测试ROBOKOP是否可以用于支持医学院入学考试中的人类推理，我们有了很有希望的初步结果[ 38］．虽然ROBOKOP KG目前是根据生物医学知识来源构建的，但一般方法并不局限于生物医学领域。事实上，代表我们机构的领导层，我们正在开发一个ROBOKOP KG的新版本，重点是探索研究计划和研究者特征之间的关系。

ROBOKOP的第二个关键特征是它支持快速发现的能力。例如，这里给出的示例用例只花了很少的时间来构建和执行，交互式UI甚至允许新手用户提出问题并探索答案子图。从ROBOKOP答案子图中收集到的机制见解很快得到了实现，从而实现了对结果的快速首次分析和对支持证据的评估。此外，ROBOKOP通过一个查询揭示了所有可能介导所观察到的暴露- imd关联的潜在基因;实际上，用户不需要花费数小时、数天或更长的时间来阅读可用的文献。ROBOKOP提供的这种发现速度也允许调查人员快速反驳可能只是虚假发现的关联(例如，如果ROBOKOP没有返回答案子图)。在本文强调的示例中，我们主要关注三个示例暴露- imd关联。虽然这看起来并不多，但一个完整的文献综述，以确定潜在的新见解，消除虚假的发现，并探索支持证据，将比使用ROBOKOP进行最初的首次分析所需的时间多得多。我们计划利用ROBOKOP的速度，在单核苷酸多态性和表型之间的关联的大规模分析中进行发现，这是更广泛的EPR工作和其他几项研究的一部分。

ROBOKOP的第三个关键特征是它的开放性。事实上，访问ROBOKOP，无论是通过UI还是直接通过Cypher查询底层KG，都不需要登录身份验证或帐户;相反，任何拥有URL的人都可以访问系统。此外，ROBOKOP KG可独立于应用程序下载[ 15］．ROBOKOP的开放性和访问它的多种途径使科学民主化，再加上应用程序提供的发现速度，应该会加速生物医学和许多其他领域的进步。